AptaPhage – fāgu displeja tehnoloģija aptamēru atlasei

Pētniecības pieteikuma Nr.
1.1.1.9/LZP/1/24/049
Pēcdoktorants
Dr. Kārlis Pleiko
Zinātniskais konsultants
Prof. Aigars Jirgensons
Projekta ieviešanas ilgums
36 mēneši
Projekta īstenošanas vieta
Latvijas Organiskās sintēzes institūts
Kopējās projekta izmaksas
184 140,00 EUR (ERAF finansējums – 156 519,00 EUR; attiecināmais valsts budžeta finansējums – 18 414,00 EUR; citi finansēšanas resursi – 9 207,00 EUR)

Projekta zinātniskais mērķis ir izpētīt iespēju izmantot fāgu displeju mutlivalentu aptamēru atlasei pret mērķiem, kas saistīti ar vēzi, izmantojot NRP-1 kā proteīna mērķi koncepcijas pierādīšanas pētījumam.

Paredzētie projekta īstenošanas rezultāti:

  • 1 zinātniskais raksts

Publicēts: 03.03.2024.

Paveiktais laika periodā no 01.03.2025. līdz 31.08.2025.

Pārskata periodā veiktas šādas pētnieciskās aktivitātes:

– himeriskā proteīna konstrukts, kurā fāga apvalka proteīns ir apvienots ar mērķa RNS saistošo proteīnu, tika izstrādāts in silico. Tika ņemtas vērā linkeru sekvences un kodonu optimizācija, lai nodrošinātu pareizu salocīšanos un ekspresiju E. coli šūnā;

– uzsākta mobilitāte Tartu universitātē;

– turpināts darbs pie himēriskā peptīdu fāga izveides. Baktērijas BL21 transformētas ar T7 fāga kapsīdas proteīna un Csy4 proteīna himērisko versiju saturošu plazmīdu. Pareizās nukleotīdu sekvences klātbūtne apstiprināta, izmantojot Sanger sekvencēšanas metodi;

– šobrīd norit apstākļu optimizācija (temperatūra, ilgums, tilpums), lai iegūtu iespējami augstāko himērisko fāgu titru;

– veikta vēl viena RNS saistošā proteīna dizainēšana, lai dotu iespēju izvēlēties optimālāko no abiem AptaPhage sistēmas izveidei.

Publicēts: 02.09.2025.